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6 Diskussion

müssten deshalb das Corrinoid-Protein SdmA und die Methyltransferase SdmC

beteiligt sein, jedoch nicht SdmB. Bei der Deletion von sdmB wurde eigentlich ein

polarer Effekt auf das Gen sdmC erwartet. Es wurde aber, wie bereits erwähnt, das

Transkript des Gens sdmC durch eine RT-PCR in der Mutante V1

∆

sdmB

nachgewiesen und ein zweiter separater Promotor dieses Gens angenommen.

Ein Ausbleiben der Aktivität in den Reportergen-Tests für alle verwendeten Stämme

bei einer DMSe-Endkonzentration von 100 µM ließe sich durch eine Verunreinigung

des DMSe mit anderen Selenverbindungen erklären, so dass diese für eine

Repression verantwortlich wären.

Eine Untermauerung der erhaltenen Ergebnisse ergab sich aus der Erstellung der

Wachstumskurven. Der Wildtyp und die Mutanten zeigten bei Selenitzugabe und bei

Selenlimitierung ein vergleichbares Wachstumsverhalten. Dagegen war die

Wachstumsrate bei der Zugabe von DMSe in den Stämmen V1

∆

sdmA, V1

∆

sdmC

und V1

∆

sdmBC reduziert, was ebenfalls auf einen Verlust der Fähigkeit hindeutete,

das DMSe zu erschließen. Wie erwartet, war beim Wildtyp und der Mutante

∆

sdmB keine verringerte Wachstumsgeschwindigkeit festgestellt worden.

Aus den bisherigen Resultaten und Folgerungen kann ein nur unvollständiges Bild

über den Mechanismus der Demethylierung des DMSe und damit der Bereitstellung

des Selens zur Biosynthese gegeben werden. So ist nicht klar, an welcher Stelle der

Weg der Erschließung des DMSe in den Deletionsmutanten unterbrochen worden ist.

Wahrscheinlich wird bei der Demethylierung des DMSe zunächst das Methanselenol

gebildet, das dann weiter demethyliert werden müsste. Beispielsweise werden bei

der Demethylierung von TMA, DMA und MMA verschiedene Stoffwechselwege

beschritten, aber alle führen zur Bildung von Methan (Ferry, 1998). Ein Protein,

MtbA, kommt in allen drei Stoffwechselwegen vor, es überträgt die Methylgruppe

vom jeweiligen Corrinoid-Protein auf das Coenzym M (Yeliseev et al., 1993;

Ferguson et al., 1996). Zur Aktivierung der Substrate sind allerdings unterschiedliche

Methyltransferasen nötig, die die Methylgruppe zunächst auf die entsprechenden

Corrinoid-Proteine übertragen. Die Methyltransferase MtmB verwendet das MMA als

Substrat und methyliert ihr Corrinoid-Protein MtmC (Burke & Krzycki, 1997). Für die

Demethylierung des DMA ist MtbB die substratspezifische Methyltransferase und

MtbC das entsprechende Corrinoid-Protein (Wassenaar et al., 1998a; Wassenaar et

al., 1998b). Der Methylgruppentransfer vom TMA auf das MttC-Protein katalysiert

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