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4 Material und Methoden

Zellsuspension wurde in 10 ml Serumflaschen überführt und gasdicht verschlossen.

Die Zentrifugation und das Waschen der Zellen erfolgte dabei in anaerober N

(95%/5%) Atmosphäre. Für die Messungen wurden die Suspensionen entweder mit

oder mit H

/CO

(80%/20%) überschichtet. TMA, DMA, MMA, DMS oder Methanol

wurden zu einer Endkonzentration von je 10 mM zu den Zellsuspensionen

zugegeben. Methan wurde anschließend gaschromatographisch mit einem

Flammenionisationsdetektor (CE Instruments, GC 8000 series, Mailand, Italien)

bestimmt. Die Messbedingungen sind in Tab. 4 angegeben. Für die Erstellung von

Eichgeraden wurden Methanstandards bekannter Konzentration (0,25% und 0,5%

in Luft) verwendet, wobei die gemessenen Peakhöhen den Gaskonzentrationen

proportional waren. Anhand der Peakhöhen der Eichwerte konnten die unbekannten

-Konzentrationen quantitativ bestimmt werden. Hierzu wurden 0,2 ml Gas in

Zeitabständen aus der Gasphase der Zellsuspensionsansätze entnommen und direkt

in den Gaschromatographen mittels einer gasdichten Spritze injiziert.

Tab. 4 Bedingungen für die gaschromatographische Messung von CH

Einstellungen am GC

Detektor Flammenionisationsdetektor

Säule Edelstahlsäule (130 × 0,2 cm)

Material Molekularsieb 0,5 nm

Temperatur (Injektor) 80 °C

(Säule) 150 °C

(Detektor) 150 °C

Trägergas Stickstoff

Eingangsdruck 5 bar

Trägergasfluss 30 ml/min

Brenngas Wasserstoff/Luft

Eingangsdruck (H

) 5 bar

(Luft) 5 bar

Brenngasfluss (H

) 10 ml/min

(Luft) 250 ml/min

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