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6 Diskussion

Wie bereits oben erwähnt, wurde angenommen, dass die Proteine SdmA, SdmB und

SdmC an der Demethylierung eines bestimmten Substrats unter Selenmangel

beteiligt sein könnten.

In vorangegangenen Arbeiten wurde gezeigt, dass M. voltae auf Methanol oder

Methylaminen nicht wächst (Whitman et al., 1982). Dabei enthielt das Kulturmedium

jedoch Selen und es wurden dort auch keine gaschromatographischen Messungen

zur Methanbestimmung durchgeführt.

Unter Selenlimitierung konnte aber auch in der vorliegenden Arbeit weder Wachstum

noch Methanbildung bei M. voltae unter Zugabe von TMA, DMA, MMA, DMS oder

Methanol festgestellt werden. Deshalb wurde eine Beteiligung der Proteine

SdmA, SdmB und SdmC an der Demethylierung dieser Substrate ausgeschlossen.

Eine in der Umwelt häufig vorkommende organische Selenverbindung ist das DMSe

(Amouroux et al., 2001; Chau et al., 1976; Francis et al., 1974; Reamer & Zoller,

1980). Es wäre daher denkbar, dass M. voltae bei Mangel anorganischer

Selenverbindungen auf dieses methylierte Substrat zurückgreift. Diese Annahme

wurde durch die Reportergen-Tests mit Stämmen, die Deletionen der Gene sdmA,

sdmB oder sdmC bzw. beider Genen sdmB und sdmC aufwiesen, bestätigt. Der für

die Transformation verwendete M. voltae-Stamm V1 trägt eine chromosomale Kopie

des Reportergens uidA unter der Kontrolle des vhc-Promotors (Pfeiffer et al., 1998).

Eine Aktivität des Reportergens war daher bei Selenmangel zu erwarten, denn nur

dann werden die Gene der Hydrogenase Vhc transkribiert (Berghöfer et al., 1994).

Wenn das DMSe von M. voltae als Selenquelle genutzt werden kann, müsste dies

eine Repression des Reporters zur Folge haben. Sind zudem die Produkte der Gene

sdmA, sdmB oder sdmC an der Erschließung des DMSe beteiligt, sollten Deletionen

in diesen Genen hingegen zu einer Expression des uidA-Gens führen.

Der Wildtyp wie auch die Mutanten zeigten in den durchgeführten Reportergen-Tests

ab einer Selenit-Konzentration von 100 nM und weniger eine Aktivität. Wurde jedoch

das DMSe als Selenquelle zugegeben, dann wurde eine Expression des

Reportergens in den Deletionsstämmen V1

∆

sdmA, V1

∆

sdmC und V1

∆

sdmBC

bereits bei einer Konzentration von 10 µM festgestellt. Daraus wurde geschlossen,

dass diese Stämme das DMSe nicht mehr als Selenquelle erschließen können. Im

Gegensatz dazu exprimiert der Wildtyp und die Mutante V1

∆

sdmB das Reportergen

erst ab einer DMSe-Konzentration von 100 nM und weniger. An der Demethylierung

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